生化所以科学家们的专长领衔，进行人工合成胰岛素前期的兵分五路探索。

包括有机合成、天然胰岛素拆合、肽库及分离分析、酶激活和转肽。

人工合成胰岛素的关键科学问题之一是“三对二硫键能否正确连接形成有活性的蛋白质构象”？

当时国际上天然胰岛素拆合中几乎观察不到重组胰岛素的活性，因此文献讨论对二硫键的正确连接率很悲观。

生化所在1959年取得了天然胰岛素拆合成功，既回答了上述关键科学问题，又确定了全合成胰岛素的研究策略。

天然胰岛素拆合早期设计了98次（有书面记录的）实验，包括胰岛素还原和A、B肽链的分离纯化、定量分析、重氧化等，表明胰岛素活性的出现正是由于拆开的A、B两条肽链的正确重组，而非少量残留的天然胰岛素。

后来又进行了100多次胰岛素拆合条件及酸性仲丁醇抽提复性折叠的优化实验，可重复地获得了拆合后的高活性重组合胰岛素结晶，并且进行了一系列的生化鉴定，为研究策略和技术路线的确定等奠定了坚实的基础。

全合成胰岛素的研究策略是分别有机合成A肽链和B肽链，再进行组合折叠，最后鉴定生物学活性和各种理化性质。

天然胰岛素拆合取得成功后，胰岛素拆合工作仍在继续，且由天（然）A链/天（然）B链扩大至天A/人B、人A/天B与人A/人B，需要大量的优化和重复实验设计。