胡荣贵研究组发现病原菌泛素化宿主蛋白并促进感染的分子机制

        7月28日，学术期刊PLOS Pathogens在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所胡荣贵研究组的论文“Bacterial effector NleL promotesenterohemorrhagicE. coli-induced attaching and effacing lesions by ubiquitylating and inactivating JNK”。该研究阐释了肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7的毒力蛋白NleL通过泛素化宿主JNK蛋白从而促进细菌感染的新分子机制。

 

        肠出血性大肠杆菌（EHEC）是一类可引起严重食源性疾病的致病菌，其中最重要的是血清型为O157:H7的菌株。EHEC O157:H7是导致人和牲畜发生腹泻和出血性肠炎的主要原因之一，其引起的爆发感染逐年增加。EHEC O157:H7感染时会在宿主细胞上引起特征性的A/E损伤，形成独特的肌动蛋白聚集结构actin pedestals；A/E损伤的出现是EHEC成功感染宿主的标志之一。一种来源于EHEC O157:H7的细菌效应蛋白NleL曾被证实在体外具有类真核生物泛素连接酶的活性，但是其在EHEC感染过程中的生物学特性及作用机理尚未清楚。

 

        EHEC在感染过程中可以将NleL蛋白传递到宿主细胞内。本研究发现，细菌蛋白NleL能够结合宿主JNK蛋白并对其特定位点进行单泛素化修饰和多泛素修饰。更为重要的是，NleL还可以有效地抑制JNK的磷酸化激活。NleL对JNK特定位点（K68）的单泛素化修饰干扰了JNK与上游磷酸激酶MKK7的结合，从而抑制了JNK磷酸化激活，进而抑制了下游c-Jun的磷酸化及转录因子AP-1的活性。AP-1还被发现可以参与调节actin pedestals（A/E损伤）的形成；而且NleL最终被证实可以通过抑制宿主JNK/AP-1通路来促进EHEC粘附宿主并形成A/E损伤。通过选用在结构和功能上类似于结肠上皮的人源Caco-2单层细胞模型进行体外细菌感染实验，发现EHEC可以在Caco-2单层上形成明显的A/E损伤，可用来替代体内感染实验，弥补EHEC不能以普通小鼠作为实验动物的缺陷。该项研究首次发现了NleL的作用底物并明确了NleL在EHEC感染过程中的生物学意义。这也是JNK蛋白首次被报道可以被进行泛素化修饰且泛素化修饰负调控磷酸化激活。

 

        该项研究是在胡荣贵研究员的指导下，由盛相鹏、尤青等完成。该项研究工作得到北京生命科学研究所的邵峰教授，中科院微生物研究所的高福、严景华教授，生化与细胞所阮康成、王红艳、惠利健、曾嵘、林安宁、王琛研究员以及东北农业大学师东方教授的大力支持。质谱数据由曾嵘课题组李青润博士协助完成。经费支持来自中科院分子细胞科学卓越创新中心、中科院先导计划、国家自然科学基金委医学部的国家杰出青年基金和生命学部项目基金支持、国家科技部项目、信号传导网络协同创新中心。该工作的数据收集还得到了生化与细胞所细胞生物学平台、分子生物学平台和动物实验技术平台的支持。